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流式细胞术检测细胞周期

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在现在的科研研究中,最初的研究基本上就是高通量筛选对照组和实验组的差异表达基因,然后进行大样本的荧光定量PCR验证,确定差异基因与某种疾病的相关性。在之后的研究中,我们就要针对差异基因进行干扰或过表达来进行细胞功能实验。其中通过流式细胞进行细胞周期的检测是比较重要的方法。
一、服务介绍

流式细胞术(FlowCytometry,FCM)

就是对在高速流动的鞘液包裹下的细胞、粒子进行分析和分选的技术,这种细胞或粒子是经过特异荧光标记的。其特点是测量速度快,每秒钟能测数千个乃至上万个细胞,且可进行多参数测量,另一特点是在分析的同时可把具有指定特征的细胞分离出来,这就是分选技术。

重要参数:前向角散射(FSC):前向角散射光的强度与细胞的大小有关,也就是说,同一个细胞群体,FSC强的,其细胞大一些,而FSC弱的,其细胞小一些。侧向角散射(SSC):侧向角散射又称90°散射或大角散射。侧向角散射光对细胞膜、胞质、核膜的折射率更为敏感,对胞内较大的颗粒也会有反应。所以,侧向角散射光的强弱可反应细胞内精细结构和颗粒的性质。荧光信号(FL):是细胞或细胞上的荧光染料被激光激发后发射出的荧光,不同的荧光染料其发射波长不同。通过荧光强度可将同一个细胞群体中的有荧光标记的细胞与无荧光标记的细胞区分开来,也就是我们通常所说的阳性细胞,也可以将阳性细胞中的高FL的细胞与低FL的细胞区分开来,也就是可以把强阳性细胞和弱阳性细胞区分开来。一般的流式细胞仪只装有一个激光光源(488nm),可测出三个FL,即FL1、FL2、FL3。FL2-W指检测荧光的脉冲宽度,区分单个细胞和双联体细胞FL2-H指脉冲高度,细胞单位面积上的荧光浓度FL2-A指脉冲面积,即细胞荧光总和。

二、服务流程

1、细胞培养
2、药物处理
3、试剂处理
4、测定吸光度
5、撰写实验报告
三、客户提供
1、培养好的细胞(大于107)以及所需药品。
2、药物作用方式(药物浓度、时间等)。
四、交付内容


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